La irrupción en los últimos años de las técnicas moleculares y la mejora de las técnicas citogenéticas ha revolucionado el diagnóstico y pronóstico de las enfermedades hematológicas provocando incluso el cambio de la clasificación de la OMS de algunas neoplasias hematológicas.
La Citogenética junto a la Biología Molecular se han integrado con las técnicas clásicas (Citología, Inmunología) en el diagnóstico hematológico.
El empleo de la médula ósea (sobre todo en leucemias agudas) aumenta el rendimiento diagnóstico respecto a la sangre periférica (aunque ésta esté infiltrada). En linfomas por el contrario deben estudiarse además ganglios o tejidos implicados, mientras que en la LLC la sangre periférica puede resultar ser la muestra adecuada para estudios citogenéticos. En general (en trastornos mieloproliferativos crónicos, mielodisplásicos y leucemias agudas) la médula ósea es la muestra de elección para la extracción de ácidos nucleicos (ADN y ARN) y efectuar los cultivos citogenéticos.
El valor diagnóstico de los hallazgos citogenéticos y moleculares se conjuga con el no menos importante valor pronóstico de muchos de ellos.

La citogenética convencional consiste en el análisis visual del juego completo de cromosomas (cariotipo) obtenidos en metafase tras un cultivo celular (requiere células en división). Permite analizar todos los cromosomas en una sola prueba pero queda limitada por la resolución del bandeo cromosómico: no detecta alteraciones inferiores a 10Mb.

La citogenética molecular consiste en el análisis mediante sondas fluorescentes (FISH) de zonas o regiones concretas de uno o varios cromosomas. Su principal ventaja es que puede aplicarse sobre células en interfase (no requiere células en división) y facilita su análisis sobre un mayor número de células. Según el diseño de la sonda de hibridación específica, la FISH puede ser: centromérica, de locus específico, de brazos cortos y/o largos, de pintado cromosómico. Existen unas técnicas de FISH más complejas que por combinación de sondas marcadas con diferentes fluorocromos se combinan permitiendo identificar cada cromosoma de un color distinto (Cariotipo espectral) o bien cada banda de un solo cromosoma (Multibanding). Estas técnicas sirven para resolver anomalías complejas y/o cromosomas marcador, no identificables por las técnicas citogenéticas convencionales.

La detección y/o cuantificación de oncogenes consiste en la detección mediante técnicas de PCR en tiempo real y/o secuenciación de los principales genes implicados en los trastornos hematológicos. La cantidad de oncogen es monitorizada a lo largo del tratamiento del proceso hematológico, como si de un marcador tumoral clásico se tratara, con el objetivo final de llegar a desaparecer (curación molecular).

PATOLOGIA MIELOIDE

LEUCEMIAS MIELOIDES AGUDAS:
Cariotipo convencional y sondas FISH para:
t(9;22) BCR/ABL
t(8;21) AML/ETO
inv(16) CBPB/MYH11
t(15;17) PML/RARA
11q23 MLL
RT-PCR cualitativa y cuantitativa para:
BCR/ABL
AML/ETO
CBPB/MYH11
PML/RARA
MLL
Detección de mutaciones en
FLT3
NPM1
WT1
c-KIT

SINDROMES MIELODISPLASICOS:
Cariotipo convencional y sondas FISH para:
del(5)(q31) y del(5)(q33-34)
del(7)(q31)
del(17)(p13) (p53)
del(20q)
CEP (8)

SINDROMES MIELOPROLIFERATIVOS:
-LEUCEMIA MIELOIDE CRONICA
Cariotipo convencional y sondas FISH para:
t(9;22) BCR/ABL
RT-PCR cualitativa y cuantitativa para:
BCR/ABL
Estudio de mutaciones gen ABL (secuenciación)

            -OTROS SINDROMES MIELOPROLIFERATIVOS 
(POLICITEMIA VERA,TROMBOCITEMIA ESENCIAL,MIELOFIBROSIS IDIOPATICA):
Cariotipo convencional y sondas FISH para:
del(20)(q12)
PCR cualitativa y cuantitativa para:
V617F JAK-2 y  mutaciones exón 12 JAK-2
MPL

-SINDROME HIPEREOSINOFILICO:
Cariotipo convencional y sondas FISH para:
FIP1PDGFRalfa
PDGFRbeta

PATOLOGIA LINFOIDE

LEUCEMIAS LINFOIDES AGUDAS:
Cariotipo convencional y sondas FISH para:
t(9;22) BCR/ABL
t(12;21) TEL/AML
11q23 MLL
MYC/IgH
RT-PCR cualitativa y cuantitativa para:
BCR/ABL

SINDROMES LINFOPROLIFERATIVOS CRONICOS:
Cariotipo convencional y sondas FISH para:

LEUCEMIA LINFOIDE CRONICA:
CEP 12
11q23 (ATM)
del(17)(p13) (p53)
del(13)(q14)
del(6)(q23)
Reordenamientos B (IgH)
Reordenamientos T (TCR)

            LINFOMA:
t(11;14) BCL-1/IgH
t(14;18) BCL-2/IgH
t(8;14) IgH/c-MYC
t(14;18) MALT/IgH
3q27 BCL-6
2p23 ALK
PCR cualitativa y cuantitativa para:
BCL-1
BCL-2
BCL-6

            MIELOMA MULTIPLE:
del(13)(q14)
del(17)(p13) (p53)
Aneuploidías (CEP 5, CEP 9 y CEP 15)
Reordenamiento IgH: (si reordena)
t(4;14) FGRF3/IgH
t(14;16) IgH/MAF
t(11;14) CCND1 Tx/IGH
si las anteriores son negativas:
t(14;20) IgH/MAFB
t(6;14) CCND3/IgH

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